Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом,






НазваниеИнструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом,
страница1/5
Дата публикации31.03.2015
Размер0.69 Mb.
ТипИнструкция
d.120-bal.ru > Документы > Инструкция
  1   2   3   4   5









ДАГЕСТАНСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ
КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

С КУРСОМ «КЛИНИЧЕСКАЯ БАКТЕРИОЛОГИЯ»

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ – ПРАКТИКУМ

ПО МИКРОБИОЛОГИИ, ИММУНОЛОГИИ И ВИРУСОЛОГИИ

ДЛЯ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА

І часть

Студента_______курса______группы___________________________факультета


_______________________________________________________________________________

Преподаватель ________________________________________________________
Зав. кафедрой _________________________________________________________

Махачкала 2011

Составители: зав. кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии

доц. М.С.Саидов, к.м.н. асс. А.И.Алиева, доценты Т.В.Царуева, А.Д.Гаджиева, Л.А.Гамидова, Г.М.Газиев.

Рецензент – д.м.н., профессор, зав. кафедрой инфекционных болезней ДГМА Ахмедов Д.Р.

Рекомендовано к печати и использованию в учебном процессе ЦК МС ДГМА

( Протокол № ____ от «____»___________________20___г.)

ИНСТРУКЦИЯ
по технике безопасности и производственной санитарии

для студентов, работающих в учебных заведениях.

Проводится работа с инфицированным материалом, чистыми культурами микробов, попадание которых в большой дозе на кожу и слизистые может привести к заражению.

Использование при работе красителей, растворов кислот и щелочей, горящих спиртовок

при неаккуратных действиях может привести к порче имущества, одежды, ожогам кожи и слизистых.
В связи с этим основными требованиями к работе в лабораториях являются: ВНИМАТЕЛЬНОСТЬ, АККУРАТНОСТЬ, ОСТОРОЖНОСТЬ.


  1. Перед входом в лабораторию студент должен надеть халат и шапочку, личные вещи убрать в стол. Нельзя ставить на стол сумки, рюкзаки и т.п.

  2. КАТЕГОРИЧЕСКИ ЗАПРЕЩАЕТСЯ: в лаборатории находиться без спецодежды, принимать пищу, пить и курить. Курение на кафедре повсеместно запрещено.

  3. На лабораторном столе студента должен быть минимум необходимых вещей, чтобы они не мешали работе. Студент обязан поддерживать порядок на столе во время работы, аккуратно и экономно обращаться с вверенным ему лабораторным имуществом и материалом.

  4. В случае попадания инфицированного материала или реактивов на руки, халат, стол, необходимо сообщить о случившемся преподавателю.

  5. При работе со спиртовками КАТЕГОРИЧЕСКИ ЗАПРЕЩАЕТСЯ перемещать горящие спиртовки или зажигать одну от другой.

  6. По окончании работы студент обязан, навести порядок на своем рабочем месте: вылить содержимое лотка в специальное ведро, вымыть лоток от красителей, сдать на стол преподавателя обработанный материал, демонстрационные препараты, протереть от иммерсионного масла объектив микроскопа.

  7. Нельзя оставлять препарат на предметном столике микроскопа.

  8. После окончания работы необходимо выключить свет на столе и тщательно вымыть руки с мылом.


С правилами техники безопасности ознакомлен -

«_____» ____________________________20__г. __________________________________

(подпись студента)

ОТМЕТКА О СДАЧЕ УЧЕБНО-ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ



дата

занятие


зачет

подпись

1












2












3












4












5












6












7












8












9












10












11












12












13












14












15












16












17












18












РАЗДЕЛ: МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

Занятие № 1
ТЕМА: Значение микробиологии для врачей-стоматологов. Режим работы в бактериологической лаборатории. Морфология бактерий. Приготовление мазка-препарата, простой метод окраски.
УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ: Ознакомить с режимом работы в баклаборатории и иммерсионной системой микроскопа. Изучить морфологию бактерий. Приготовить мазок-препарат из культур бактерий и окрасить его простым методом.
КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ:


  1. Отличие эукариотов от прокариотов.

  2. Кто открыл впервые микроорганизмы?

  3. Заслуги работ Л. Пастера, Р. Коха, И.И. Мечникова.

  4. Назовите типы современных микроскопов.

  5. Какой режим работы в микробиологической лаборатории?

  6. Как устроена бактериологическая лаборатория?

  7. Какие микроскопы применяют для изучения микробов и принцип их устройства?

  8. Какова систематика микробов?

  9. Как пользоваться иммерсионной системой микроскопа?

  10. От чего зависит разрешающая способность микроскопа?

  11. Какие формы имеют бактерии?

  12. Назвать шаровидные формы бактерий. Привести примеры.

  13. Назвать палочковидные, извитые формы бактерий. Привести примеры.

  14. Какие красители применяют в микробиологической практике?

  15. Как приготовить препарат из бульонной и агаровой культур?

  16. Этапы приготовления бактериального препарата.



САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ


  1. Ознакомиться с оборудованием, режимом и с правилами работы в бактериологической лаборатории.

  2. Ознакомиться с иммерсионной системой микроскопа.

  3. Промикроскопировать готовые препараты из чистых культур стафилококка, стрептококка, гонококка, кишечной палочки, зарисовать в тетради основные формы бактерий.

  4. Оформление протокола исследования.

  5. Из бульонной культуры стафилококка и стрептококка приготовить мазок, высушить, зафиксировать. Окрасить простым методом. Промикроскопировать, зарисовать.

  6. Из агаровой культуры кишечной палочки приготовить мазок.
    Высушить, зафиксировать, окрасить простым методом. Промикроскопировать, зарисовать.


МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ


  1. Техника микроскопирования


В связи с очень малыми размерами бактерий изучение их морфологии возможно только при большом увеличении, достигаемом при помощи иммерсионного масла, которое позволяет создать единую систему между предметным стеклом и особым, х90-кратным (с черной полоской) объективом.

При микроскопировании окрашенных объектов необходимо создать яркое освещение с помощью вогнутого зеркала, поднятого конденсора и полностью открытой диафрагмы.

Каплю иммерсионного масла наносят на готовый препарат на стекле. Затем стекло переносят на столик микроскопа. Иммерсионный объектив погружают в масло осторожно, под контролем глаза до явного контакта объектива с маслом. Затем объектив поднимают, не выводя из капли масла и глядя в окуляр для нахождения объекта исследования («поля зрения»). Четкое изображение препарата достигается регулировкой сначала макровинтом (для обнаружения объекта), а затем микровинтом для регулировки резкости изображения.
ПРОТОКОЛ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материал исследования – мазки-препараты

Цель – изучение иммерсионной микроскопии, знакомство с морфологией бактерий.





Исследуемый материал

Результаты исследования

Графическое изображение

1.

Мазок из чистой культуры стафилококка. Окраска …..

В поле зрения видны шаровидные клетки – коки, синего цвета расположенные в виде «виноградных гроздей».




2.

Мазок из чистой культуры стрептококка. Окраска ……






3.

Мазок из исследуемого материала гонококка. Окраска…….






4.

Мазок из чистой культуры кишечной палочки.

Окраска …..







Заключение: Освоена техника иммерсионной микроскопии. Изучены шаровидные и палочковидные формы бактерий.


  1. Техника приготовления бактериального препарата


Мазки готовят на обезжиренных предметных стеклах, предварительно обрисовав карандашом место будущего мазка с противоположной стороны предметного стекла. При приготовлении мазка из жидкой питательной среды, материал берут стерильной бактериальной петлей, наносят на стекло и растирают над очерченной площадкой. В случае приготовления мазка из плотной питательной среды, на предметное стекло предварительно наносят каплю воды, и материал растирают, постепенно готовя однородную взвесь.

Бактериальную петлю перед использованием и с оставшейся культурой стерилизуют в пламени горелки. Приготовленный мазок высушивают на воздухе или держа высоко над пламенем спиртовки.

После этого препарат фиксируют, для чего мазок стороной, где нет материала, троекратно проводят через середину пламени горелки.

Фиксация позволяет убить микробы, прикрепить их к стеклу и, наконец, убитые микробы окрашиваются лучше, чем живые.


  1. Техника простого метода окраски


Окраска бактерий преследует цель сделать их резко отличными от фона, что позволяет изучить под микроскопом их морфологию и структуру. В микробиологии используют простые и сложные методы окраски препаратов.
При ПРОСТОМ МЕТОДЕ окраски, мазок окрашивают каким-либо одним красителем, например, водным фуксином (1-2 мин.) или метиленовой синью (3-5 мин.), промывают водой, высушивают и микроскопируют.

ПРОТОКОЛ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материал исследования – чистая культура микроорганизмов

Цель – изучение техники приготовления мазка и окраски простым методом





Исследуемый материал

Результаты исследования

Графическое изображение

1.

Мазок из чистой культуры кишечной палочки.

Окраска …..


В поле зрения видны …..




2.

Мазок из чистой культуры стафилококка.

Окраска …..


В поле зрения видны …..





Заключение: Освоена техника приготовления мазка, изучен простой метод окраски.

Занятие № 2
ТЕМА: Структура бактериальной клетки. Сложные методы окраски по Граму и Нейссеру.
УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ: Освоить сложный метод окраски по Граму и метод окраски зерен волютина по Нейссеру.
КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ:
1. Назовите основные структуры бактериальной клетки.

2. Каково строение и функции клеточной стенки и цитоплазматической мембраны?

  1. Химический состав, организация и функция бактериального ядра.

  2. Принципиальное отличия простых способов окраски от сложных.

  3. Перечислите этапы окраски по Граму, приведите примеры грамположительных и грамотрицательных бактерий. Механизм окраски по Граму.

  4. Перечислите этапы окраски по Нейссеру. Практическое применение этого метода окраски.

  5. Что такое зерна волютина, их химическая природа?

  6. Чем отличаются L-формы бактерий от типичных бактерий.

  7. Что такое протопласты, сферопласты, их отличие от микоплазм.


САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ


  1. Освоение сложных методов окраски:

а) Приготовить мазок из смеси чистых культур стафилококка и кишечной палочки. Окраска по Граму.

б) Приготовить мазок из взвеси ложнодифтерийной палочки (Corynebacterium. pseudodiphteriae). Окраска по Нейссеру.

в) Промикроскопировать с использованием иммерсионной системы микроскопа.

  1. Внести в латино-русский словарь все названия микробов к данному занятию.

  2. Оформление протокола исследования.


МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.
СЛОЖНЫЕ МЕТОДЫ окраски включают последовательное нанесение на препарат красителей, различающихся по химическому составу и цвету, протрав и дифференцирующих веществ. Это позволяет предварительно дифференцировать микробы и выявить определенные структуры клеток.
Метод окраски по Граму
Окраска по Граму является важным диагностическим признаком идентификации бактерий. В результате окраски по Граму все бактерии делятся на две группы: грамположительные (фиолетового) и грамотрицательные (красного цвета).

Техника окраски по Граму


  1. Фиксированный мазок кладут на бактериологический мостик и покрывают полоской фильтровальной бумаги, пропитанной раствором генцианвиолета; на бумажную полоску наносят воду. Через 2 минуты полоску удаляют.

  2. Не промывая препарат водой, наносят раствор Люголя на 1 минуту. Затем раствор Люголя сливают .

  3. Препарат обесцвечивают спиртом 20-30 секунд (до отхождения фиолетовых струек краски).

  4. Препарат промывают водой.

  5. Окрашивают водным фуксином 2 минуты.

  6. Препарат промывают водой.

  7. Высушивают фильтровальной бумагой.


Метод окраски по Нейссеру
Метод окраски по Нейссеру используется для выявления зерен волютина. При окраске этим способом тела бактерий окрашиваются в светло-коричневый цвет, зерна волютина в темно-синий, почти черный цвет. У дифтерийной палочки зерна волютина распологаются на концах палочки, а у ложно - диффтерийной палочки - отсутствуют или располагаются множественно по ходу палочки.
Техника окраски по Нейссеру


  1. На фиксированный мазок наносят раствор уксуснокислой синей Нейссера на 2-3 мин.

  2. Не промывая водой, наносят раствор Люголя – 10-30 сек.

  3. Мазок промывают водой.

  4. Докрашивают раствором везувина -1 мин.

ПРОТОКОЛ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материал исследования – мазки-препараты

Цель – изучение сложных методов окраски по Граму и Нейссеру




Исследуемый материал

Результаты исследования

Графическое изображение

1.

Смешанный мазок из чистых культур кишечной палочки и стафилококка.

Окраска по …..


В поле зрения видны …..




2.

Мазок из ложнодифтерийной палочки. Окраска по …..


В поле зрения видны …..





Заключение: Изучены сложные методы окраски по …….


Занятие № 3
ТЕМА: Структура бактериальной клетки. Кислотоустойчивые бактерии. Споры. Методы их выявления.

УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ: Изучить структуру бактериальной клетки. Методы выявления спор. Метод Ожешко. Особенности кислотоустойчивых бактерий и их окраска по методу Циля - Нильсена.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ:


  1. Какова структура бактериальной клетки?

  1. Назовите кислотоустойчивые микроорганизмы полости рта и чем обусловлены его свойства?

  1. Назовите этапы окраски бактерий по Цилю-Нильсену.

  2. Для каких бактерий и почему применяется метод окраски по Цилю-Нильсену?

  1. Дайте характеристику спор бактерий (их форма, расположение, ультраструктура, значение).

  2. Перечислите стадии спорообразования. Как происходит прорастание спор в вегетативные клетки?

  1. Назовите этапы окраски спор по методу Ожешко.

  1. При какой температуре погибают споры и где надо стерилизовать споросодержащий материал.


САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ


  1. Освоение сложных методов окраски:

а) Приготовить мазок из мокроты (БЦЖ). Окраска по Цилю –Нильсену.

б) Приготовить мазок из взвеси спорообразующих бактерий (почвенная болтушка). Окраска по Ожешко.

в) Промикроскопировать с использованием иммерсионной системы микроскопа.

  1. Оформление протокола исследования.

  2. Внести в латино-русский словарь все названия микробов к данному занятию.


МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.
1. Метод окраски по Цилю-Нильсену



Для обнаружения некоторых микробов, богатых липидами (например, возбудителей туберкулеза, лепры и др.), применяют метод окраски по Цилю-Нильсену.


  1. Для окрашивания используют концентрированный раствор карболового фуксина Циля. С целью улучшения проникновения красителя в клетку препарат с наложенной на него полоской фильтровальной бумаги и красителем подогревают над пламенем горелки троекратно до появления пара.

  2. Затем препарат обесцвечивают 5% раствором серной кислоты, предварительно удалив фильтровальную бумагу.

  3. Промывают водой.

  4. Докрашивают метиленовой синей в течение 3-5 минут

  5. Препарат промывают водой.

  6. Высушивают фильтровальной бумагой.

Обесцвечивание кислотой приводит к потере красителя кислотоподатливыми микробами, и они окрашиваются в синий цвет. Кислотоустойчивые микробы остаются красными.


  1. Метод окраски по Ожешко




  1. На нефиксированный мазок наносят 0,5% раствор соляной кислоты и подогревают на пламени горелки в течение 2 минут, до появления паров.

  2. Препарат промывают водой, высушивают и фиксируют.

  3. Фиксированный препарат окрашивают по методу Циля-Нильсена.


Споры бактерий после данной окраски приобретают красный цвет, а тело бактерий – синий.

ПРОТОКОЛ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материал исследования – мазки-препараты

Цель – изучение сложных методов окраски по Цилю-Нильсену и Ожешко





Исследуемый материал

Результаты исследования

Графическое изображение

1.

Мазок из чистой культуры спорообразующих бактерий.

Окраска по ….


В поле зрения видны …..




2.

Мазок из мокроты.

Окраска по …..


В поле зрения видны …..





Заключение: Изучены сложные методы окраски по …….
Занятие № 4
ТЕМА: Структура бактериальной клетки. Капсулы. Жгутики. Методы их выявления (метод Бурри-Гинса и методы «висячей»и «раздавленной» капли). Морфология актиномицет, грибов, спирохет, простейших.
УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ: Освоить технику приготовления мазка. Освоение сложных методов окраски микробов по Бурри-Гинсу. Определение подвижности бактерий методом «висячей» и «раздавленной» капли. Изучить морфологию, актиномицетов, грибов, спирохет и

простейших.


КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ:


  1. Назовите условия, способствующие образованию капсул, особенности химического состава и значение капсулы для патогенных микробов.

  2. Назовите микробы:

а) образующие капсулу только в организме человека;

б) образующие капсулу в организме животного или человека и вне его.

  1. Перечислите методы выявления капсул.

  2. Каково строение, химический состав и функции жгутиков.

  3. Перечислите методы обнаружения жгутиков и подвижности у бактерий.

  4. Назовите группы микробов в зависимости от расположения
    жгутиков.

  5. Перечислите морфологические особенности актиномицетов.В чем состоят их сходство и различия с бактериями и грибами?

  6. Назовите основные отличительные признаки грибов: Muсог, Aspergillus, Penicillium.

  7. Опишите морфологические особенности дрожжей и дрожжеподобных грибов. Чем они отличаются между собой и от бактерий?

  8. Какое положение занимают спирохеты в систематике микроорганизмов?

  9. Перечислите морфологические особенности спирохет. По каким морфологическим особенностям дифференцируют спирохеты рода: Treponema, Borrelia, Leptospira.

  10. Какие методы используют для изучения морфологии спирохет?

  11. Дайте характеристику патогенных простейших.

  12. Как обнаружить в крови больного плазмодии малярии? Какой метод окраски применяют?

  13. Опишите строение лейшмании и токсоплазм.


САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ


  1. Из зубного налета приготовить препарат по Бурри, окрасить по Гинсу. Микроскопировать. Зарисовать.

  2. Из взвеси суточной культуры E.coli в физиологическом растворе приготовить препарат «висячую» каплю. Микроскопировать.

  3. Зарисовать в тетрадь расположение и количество жгутиков у различных микроорганизмов.

  4. Из культур плесневых грибов (Penicillium) приготовить препарат - окрасить простым методом, промикроскопировать и зарисовать в тетрадь

5. Приготовить препарат из культуры дрожжевых грибов. Окрасить простым методом. Промикроскопировать, зарисовать.
6. Зарисовать три вида спирохет: трепонемы, боррелии и лептоспиры.

7. 3арисовать в тетрадь патогенные для человека простейшие (дизентерийную амебу, лейшмании, токсоплазмы).
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.
1. Метод окраски по Бурри-Гинсу
1. Готовят препарат по Бурри: смешивают каплю взвеси микробов с каплей туши и при помощи стекла со шлифовальным краем готовят мазок также, как мазки из крови;

2. Затем его высушивают и фиксируют.

3. На мазок наносят водный раствор фуксина (в разведении 1:3) на 1-2 минуты.

4. Промывают водой, высушивают на воздухе и микроскопируют.
Бактерии окрашиваются в красный цвет, а капсулы остаются неокрашенными.
2. Метод «висячая капля»
Каплю исследуемого материала наносят на середину обезжиренного покровного стекла. Затем покровное стекло быстро поворачивают каплей вниз и накладывают на предметное стекло с углублением («лункой») в середине. Капля должна свободно свисать в углубление, не соприкасаясь с его дном и краями. Края выемки на предметном стекле следует предварительно смазать вазелином. Таким образом, капля оказывается герметически закрытой во влажной камере и защищенной от высыхания.

3. Метод «раздавленная капля»
На середину предметного стекла наносят петлей или пипеткой каплю исследуемого материала. Эту каплю накрывают покровным стеклом, осторожно накладывая его пинцетом, чтобы в жидкости не образовалось пузырьков воздуха. Удачно сделанная капля заполняет все пространство между покровным и предметным стеклом, но при этом жидкость не выступает за края покровного стекла.
В микробиологической практике методы «висячей» и «раздавленной» капли используются для определения подвижности бактерий.

ПРОТОКОЛ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материал исследования – зубной налет

Цель – изучение сложного метода окраски по Бурри-Гинсу и определение подвижности бактерий жгутиков методами «висячей капли» и «раздавленной капли»





Исследуемый материал

Результаты исследования

Графическое изображение

1.

Мазок из зубного налета для выявления капсульных бактерий.

Окраска по …..

В поле зрения на темном поле видны …..




2.

Мазок из взвеси суточной культуры E.coli.

Метод ……


В поле зрения видны …..






3.

Мазок из взвеси суточной культуры E.coli.

Метод ……



В поле зрения видны …..






Заключение: Изучены сложный метод окраски по …….

для выявления капсулы бактерий, а также методы……………………………………для определения подвижности бактерий.

ПРОТОКОЛ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материал исследования – мазки-препараты

Цель – приготовление мазков-препаратов и микроскопия.




Исследуемый материал

Результаты исследования

Графическое изображение

1.

Из культуры плесневых грибов (Penicilinum) приготовить нативный препарат.


В поле зрения видны …..



2.

Приготовить препарат из культуры дрожжевых грибов. Окраска простым методом.


В поле зрения видны …..







Заключение:

ЗАРИСОВАТЬ





Название возбудителя

Графическое изображение



1.



Treponema pallidum

(бледная спирохета - возбудитель сифилиса)




2.


Borrelia recurrentis

(возбудитель возвратного тифа)





3.

Leptospira interrogans

(возбудитель лептоспироза)




4.

Актиномицеты




5.

Друза актиномицета





6.

Нитчатый гриб мукор





7.

Нитчатый гриб аспергилл






8.

Нитчатый гриб пеницилл




9.

Лейшмании




10.

Токсоплазма






11.


Амеба




Занятие № 5
ТЕМА: Морфология риккетсий, хламидий, вирусов, микоплазм. Итоговое занятие по разделу: «Морфология и строение микроорганизмов»

Контроль знаний студентов проводится по разработанным на кафедре тестовым вопросам 1,2, 3-го уровней.
УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ: Изучить особенности морфологии хламидий, микоплазм, риккетсий и вирусов.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ:


  1. Какое положение занимают риккетсий и хламидий в систематике микроорганизмов?

  2. Опишите строение и химический состав риккетсий и хламидий.

  1. Почему вирусы выделены в особое царство «VIRA».

  2. Структура и химический состав вириона, морфология вирусов, типы симметрии

  1. Что собой представляют внутриклеточные вирусные включения?

  1. Принципы классификации вирусов.

  2. Что такое бактериофаг?

  3. Строение микоплазм.


САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ


  1. Промикроскопировать, используя люминесцентный микроскоп готовый препарат из соскоба уретры больного с диагнозом хламидиоз.

  2. Используя таблицы и учебник зарисовать схему строения хламидий с их структурными элементами.

  3. Изучить структуру вируса гриппа и ВИЧ по таблицам и электронно-микроскопическим фотографиям, зарисовать.

  4. Оформление протокола исследования.

  5. Зарисовать микоплазмы.



МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.


  1. Методика окраски по Романовскому-Гимзе


Окраска по Романовскому-Гимза является одним из основных методов при изучении морфологии паразитов крови, а также при исследовании форменных элементов крови.

Краски Романовского-Гимза – это смесь азура, эозина и метиленовой синей. Будучи в растворе сине-фиолетового цвета, она окрашивает клеточную плазму в голубой цвет, а ядра клеток, зернистость, слизь капсулы бактерий – красно-фиолетовый цвет.

К 10 мл дистиллированной воды нейтральной реакции (рН 6,8-7,0) непосредственно перед окраской препарата прибавляют 10 капель краски и тотчас же наливают на фиксированный препарат (или погружают в стаканчик с краской). Через час краску сливают, препарат промывают водой, высшивают на воздухе и исследуют.

Если поместить препарат с краской в термостат при 37º, то окрашивание происходит быстрее (за 30-40 минут).


  1. Методика окраски по Здродовскому


Препарат тонким слоем наносят на стекло, фиксируют на пламени и окрашивают разведенным карболовым фуксином (10-15 капель фуксина на 10 мл дважды дистиллированной воды) в течение 5 минут. Затем препарат слегка обесцвечивают погружением на 1-3 сек. (0,01%) раствора соляной кислоты, промывают водой и докрашивают в течение 30 сек. 1% водной метиленовой синей.
ПРОТОКОЛ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материал исследования – мазки-препараты

Цель – изучение сложных методов окраски по Романовскому-Гимзе и Здродовскому





Исследуемый материал

Результаты исследования

Графическое изображение

1.

Мазок из соскоба уретры, больного хламидиозом.

Окраска по …..


В поле зрения видны …..




2.

Зарисовать морфологические варианты риккетсий по таблице.









3.

Зарисовать вирион гриппа по таблице.









4.

Зарисовать вирион ВИЧ по таблице.








5.

Зарисовать микоплазму







РАЗДЕЛ: ФИЗИОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ
Занятие № 6
ТЕМА: Культивирование бактерий. Питание бактерий. Питательные среды и методы их стерилизации. Выделение чистой культуры аэробных бактерий (1 день исследования).
УЧЕБНАЯ ЦЕЛЬ: Ознакомиться с различными питательными средами, способами приготовления основных питательных сред, методами и техникой культивирования бактерий.
КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ ЗАНЯТИЯ:


  1. Требования, предъявляемые к питательным средам.

  2. Принципы классификации питательных сред и их применение в микробиологической практике.

  3. Как проводят стерилизацию простых питательных сред? Как стерилизуют

сахаросодержащие питательные среды?

  1. Какие вещества используют для приготовления плотных питательных сред.

  2. Какие среды называются элективными? Приведите примеры.

  3. Какие известны дифференциально-диагностические среды? Их целевое назначение.

  4. Способы и типы питания бактерий.

  5. Что такое культура бактерий? Чистая культура бактерий? Почему надо работать с чистой культурой?

  1. Способы посева на жидкие и плотные питательные среды.

  2. В чем заключается бактериоскопический и бактериологический методы диагностики инфекционных заболеваний?

  3. Какие значения рН являются оптимальными для выращивания бактерий на средах?

  4. Какой аппарат используют для культивирования бактерий? Оптимальная температура культивирования бактерий.


САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ


  1. Ознакомление с различными питательными средами, способами их приготовления. Демонстрация готовых питательных сред (СПБ, СПА, желчный бульон, сахарный агар, щелочной агар, молочно-солевой агар, кровяной агар).

  2. Характеристика методов стерилизации (шаблон домашнего задания).

  3. Демонстрация мазка, приготовленного из исследуемого материала. Окраска по Граму. Результаты микроскопирования зарисовать.

  4. 1-й этап бактериологического метода исследования. Посев исследуемого материала на чашку с СПА с помощью бактериальной петли.

5. Оформление протокола исследования.
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ


  1. Из исследуемого материала приготовить мазок, окрасить по Граму. Результаты ориентировочной микроскопии зарисовать в протоколе и на основании микроскопической картины сделать предварительный вывод о наличии микробов в исследуемом материале.




  1. Бактериальной петлей провести посев исследуемого материала на плотную питательную среду (чашку с СПА) следующим способом:

Взять пробирку с исследуемым материалом в левую руку. В правой руке находится стерильная петля, которую следует держать как писчее перо. Правым мизинцем прижать пробку к мякоти ладони, вынуть ее из пробирки и держать в руке. Ввести петлю в пробирку, охладить ее о внутреннюю стенку пробирки, взять исследуемый материал петлей и, не дотрагиваясь до стенок пробирки, вынуть бактериальную петлю. Пробирку и край ее провести через огонь, закрыть пробирку и поставить в штатив. Провести посев материала на питательную среду.
При посеве необходимо строго соблюдать определенные правила.

Посев производить только вблизи пламени горелки. Чашку с агаром раскрыть только тогда, когда материал находится на петле! Чашка с питательной средой должна лежать на столе крышкой кверху. Кончиками пальцев левой руки нужно взяться за крышку чашки и легким движением опрокинуть чашку, прижав ее указательным и средним пальцами к ладонной мякоти большого пальца. Крышка кладется на стол, а открытая чашка остается в руке. Открытую чашку можно держать вертикально или слегка наклонно. Во время посева нельзя разговаривать. Петлю с материалом осторожно приложить к поверхности агара вблизи от края чашки, удаляя тем самым излишки взятого материала. Затем петлю приложить к другому участку агара и распределить материал петлей параллельными штрихами на расстоянии 0,5 см в двух взаимоперпендикулярных направлениях в виде сетки.

Посев петлей проводить осторожно, чтобы не повредить поверхность среды. Для этого петля должна быть всегда параллельна плоскости агара. Это достигается наклоном чашки, находящейся в левой руке. По окончании посева чашку кладут в открытую крышку, петлю прокаливают и ставят в штатив. Надписи делают только на дне чашке и посевы помещают в термостат (37ºС) на необходимое для роста бактерий время (чаще всего – на 20-24 часа).
Для культивирования бактерий используют питательные среды. К ним предъявляется ряд требований:

  • питательность – среды должны содержать все необходимые для питания бактерий вещества;

  • изотоничность – они должны содержать набор солей для поддержания осмотического давления;

  • оптимальный рН (для большинства бактерий 7,2 – 7,6);

  • прозрачность;

  • стерильность.


По консистенции питательные среды делятся на: жидкие, плотные и полужидкие.

По составу питательные среды делят на:

  • простые: 1% пептонная вода, питательный бульон (СПБ), сухой питательный агар (СПА);

  • сложные: сахарный бульон, сывороточный агар, кровяной агар, желчный бульон, желточно-солевой агар);

  • синтетические (среды известного состава).


По назначению питательные среды классифицируют на:

  • дифференциально-диагностические на которых различные виды бактерий дают различный рост; например среды Эндо, Левина, Плоскирева, Гисса.

  • элективные или избирательные среды, на которых одни виды бактерий растут, а другие не растут или их рост подавляется. Например, 10% желчный бульон для сальмонелл брюшного тифа, желточно-солевой агар для стафилококков др.


  1   2   3   4   5

Добавить документ в свой блог или на сайт

Похожие:

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconИнструкция по технике безопасности и производственной санитарии для...
Проводится работа с инфицированным материалом, чистыми культурами микробов, попадание которых в большой дозе на кожу и слизистые...

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconСодержание сроки ответственные
Лекция: «Инструкция по технике безопасности жизни и здоровья воспитанников на прогулочных площадках в зимнее время»

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconОбщие вопросы производственной токсикологии. Классификация вредных...
Краткие сведения по истории формирования производственной санитарии и гигиены труда

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconУчебно-методический комплекс к программе по формированию здорового...
...

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconИнструкция по технике безопасности, охране жизни и здоровья детей...
Педагог должен знать инструкцию по оказанию первой доврачебной помощи при ушибах, кровотечениях, отравлениях, вывихах, переломах,...

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconПлан практических занятий по терапевтической стоматологии для студентов
Инструктаж по технике безопасности. Клиника, диагностика, дифференциальная диагностика и лечение многоформной экссудативной эритемы....

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconПравила оказания первой доврачебной помощи при характерных травмах...
Для учащихся по мерам безопасности при занятиях игровыми видами спорта (баскетбол, волейбол, гандбол) 34

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconИнструкция по технике безопасности для детей в весенний период. Список...
Весной ребенок особенно подвержен опасности заболевания, так как имунная система ослаблена после зимнего периода. Опасность подстерегает...

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconПрограмма производственной практики по профилю специальности (технологической)...
Программа предназначена для студентов ветеринарного отделения, а также для руководителей практики от колледжа и от предприятия и...

Инструкция по технике безопасности и производственной санитарии для студентов, работающих в учебных заведениях. Проводится работа с инфицированным материалом, iconРоссийской Федерации «казанский (приволжский) федеральный университет»
Учебно-методическое пособие предназначено для студентов II курса специальностей 011100 геология, 011400 гидрогеология и инженерная...

Вы можете разместить ссылку на наш сайт:


медицина


При копировании материала укажите ссылку © 2016
контакты
d.120-bal.ru
..На главную